關於NEPA21的常見問題解答

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Questions Answers
Q1 NEPA21可(kě)以用於細菌或酵母的電轉(zhuǎn)化嗎? A1 不行,NEPA21是專用於動物細胞或植物原生質體轉染的,基於方波波形而設計,電壓(yā)控製精確且電刺激溫和,有利於提高轉染效率和細胞(bāo)存活率。轉化(huà)細菌和酵母適宜(yí)使用基(jī)於指數衰減波波形的電穿孔儀,或其(qí)它能產生高壓脈衝的裝置。
Q2 什麽是電(diàn)穿孔脈衝(poring pulse)? A2 電穿孔脈衝(chōng)是用於使細胞膜或核膜(mó)上產生(shēng)小孔的脈衝電刺激(jī),DNA或RNA等外源基因(yīn)可以通過小(xiǎo)孔進入到細胞內(nèi)。這(zhè)是用電穿孔(kǒng)法(fǎ)進行基因導入的基本(běn)原理,大部分品(pǐn)牌的電轉染儀都設計有這個步驟。NEPA21除可以(yǐ)產生電穿孔脈衝外,還具備很多新功能,請(qǐng)參看Q3, Q4 和(hé)Q5
Q3 什麽是導入脈衝(chōng)(transfer pulse)? A3 導入(rù)脈衝用於將帶負電的核酸分子通過"電泳效應"導入到細胞中,采用低壓和長脈衝時間的設計,充分利用"小孔修複"的這段時間,大大增加基(jī)因的轉染效率。這是NEPA GENE的專利技術(shù)。
Q4 為什(shí)麽要進行基因的反向導入? A4 在體外轉染(in vitro)尤其是懸浮狀態下(xià)轉染時,雙向的(de)基因導入模式,可以大大提高轉(zhuǎn)染效率;在活體(in vivo)轉染時,雙向導入(rù)模式(shì),可以擴大轉染區域。這是NEPA GENE的專利技術。
Q5 為什麽設計多次脈衝? A5 多次脈衝可以提(tí)高穿孔(kǒng)效率和導入效(xiào)率,從(cóng)而提(tí)高轉染率。由於NEPA21的多次脈衝是采用"電壓衰減"的方式進行的,不會給細(xì)胞造成額外的損傷。這是NEPA GENE的專利技術,也是(shì)NEPA21獲得高轉染效率和高細胞(bāo)存(cún)活率的重要原因之一。L
Q6 怎樣選擇in vivo, in ovo, ex vivo實驗用的電極? A6 請將你需要做的實驗告訴我們,我們會(huì)為您推薦合(hé)適(shì)的電極和提供相關的文獻(reference)、實驗方案(protocol)供您參考。讓麻豆文化传媒精品观看成為您的私人實驗顧問!
Q7 怎樣選擇(zé)合適的電轉杯耗(hào)材? A7 一般情(qíng)況,我們推薦您使用2mm間隔的電轉杯,它(tā)適用(yòng)的細胞數量範圍最廣,也是最多研究者使用的電轉(zhuǎn)杯型號。針對這個型號(hào)的電轉杯,我(wǒ)們可以提(tí)供的實(shí)驗方案(protocol)共享(xiǎng)服務更多、準確性更高。
Q8 NEPA21與(yǔ)其它品牌的電轉(zhuǎn)杯兼容嗎?或者(zhě),NEPA的電轉杯可以用於其它品牌(pái)的電轉染儀嗎? A8 理論上隻要大小合適,電轉杯(bēi)是通用(yòng)的。但不同(tóng)廠家使用的模具和材料有差異,因此電轉杯的電阻會有(yǒu)差(chà)別。當您使用其他品牌的電轉杯(bēi)來執行我們為您建議的實驗方案(protocol)時,所取(qǔ)得的效(xiào)果與使用NEPA GENE電轉杯的效果可能會有差別。同理,當您將NEPA GENE的電轉杯用於其它品牌的儀器時,也需要對電轉染的參數進行優化調整。
Q9 NEPA21的轉染過程(chéng)是否別的試劑輔助? A9 不需要,電轉染(rǎn)時隻需使用您平時培養細胞用的基礎培養基(不含血清)。目前隻有NEPA21能做到這一(yī)點。
Q10 為什麽你們不將對應於不同細胞或組(zǔ)織的轉染(rǎn)方案(protocol)在網頁中列出來? A10 不同的細胞類型所適用的轉染程序不一(yī)樣,即使是名稱、來源相同的細胞,在不同實驗室的培養環境下,細胞膜對電刺激的反應亦可能不一致。因此,我們不建議死板的將protocol與cell type一一對應。我(wǒ)們(men)會根據您的細胞的具體情況,為您(nín)設計一套個性化的轉染方案(protocol)。多次實踐經驗告訴我們,如果僅在網頁(yè)上給不同細胞(bāo)羅(luó)列一個"標準(zhǔn)程序",您在實際(jì)使用中很(hěn)可能得不到網頁上所顯示的最佳轉染效果。
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